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 分類: 微生物組測序
在不同農(nóng)業(yè)管理模式下了解叢枝菌根真菌(AMF)的生物多樣性和組成,可能對可持續(xù)強(qiáng)化柳枝稷作為生物能源作物的種植具有重要意義。本文利用PacBio單分子測序和擴(kuò)增子序列變異(ASV)水平的分類分辨率,評估了氮施肥對柳枝稷AMF的影響,并探索了三個不同生產(chǎn)力位點(diǎn)AMF和柳枝稷產(chǎn)量之間的關(guān)系。結(jié)果表明AMF多樣性與柳枝稷產(chǎn)量不相關(guān),但AMF家族豐富度與柳枝稷產(chǎn)量之間存在較強(qiáng)的正相關(guān)關(guān)系;本研究的每個位點(diǎn)均存在Paraglomus brasilianum獨(dú)特的ASV,表明Paraglomus brasilianum在種內(nèi)水平存在區(qū)域隔離;此外研究發(fā)現(xiàn)Pervetustaceae可能有利于柳枝稷在壓力環(huán)境中生存。?
文獻(xiàn):Community Structure of Arbuscular Mycorrhizal Fungi in Soils ofSwitchgrass Harvested for Bioenergy
期刊:Applied AND Environmental Microbiology

原文鏈接:https://doi.org/10.1128/aem.00880-20

材料方法

實(shí)驗(yàn)材料:柳枝稷的三個不同的生產(chǎn)地點(diǎn),每個地點(diǎn)2種處理方式:不施加氮元素(N-)和施加粒狀硝酸銨(N+),每個處理4個重復(fù)。
實(shí)驗(yàn)方法:AMF特異引物(wSSUmCf?與wLSUmBr?),Pacbio Sequel?平臺測序
分析方法:Pacbio CCS(minPasses>5, minimum predicted accuracy>0.9)?+DADA2

研究結(jié)果

1.ASVs的分類與系統(tǒng)發(fā)育
測序共產(chǎn)生190,700條高質(zhì)量、非嵌合體ccs序列,聚類產(chǎn)生436個?ASVs,通過稀釋性曲線趨于平緩表明AMF多樣性的采樣完整。基于UNITE數(shù)據(jù)的注釋結(jié)果,436個ASVs分布在球囊菌門(Glomeromycotina)的4個亞門中,共注釋得到7個科,13個及21個種?;谌鄨D表明一些高豐度的ASVs在不同實(shí)驗(yàn)單元中一致存在,暗示了柳枝稷中核心微生物組中的存在。本研究中也發(fā)現(xiàn)的一些ASVs可能是未被描述的AMF譜系,基于ASVs的系統(tǒng)發(fā)育分析表明,我們在Pervetustaceae?中發(fā)現(xiàn)了7個ASVs,這些ASVs在漢考克地區(qū)的沙質(zhì)土壤中很普遍,這表明它們可能在限水或營養(yǎng)不良的條件下對柳枝稷具有一定的脅迫耐受性。

 

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2.氮素補(bǔ)充對柳枝稷產(chǎn)量及土壤變量的影響
在萊茵蘭德試驗(yàn)區(qū),與對照試驗(yàn)區(qū)相比,施氮提高了柳枝稷的產(chǎn)量,但是在其他2個地區(qū)中沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異;

全磷、全氮、C:N比值、AMF的系統(tǒng)發(fā)育指數(shù)、物種豐富度和科水平物種豐富度在不同地點(diǎn)均有顯著差異。置換方差分析(PERMANOVA)結(jié)果表明,N處理對ASV?的UniFrac群落差異無顯著影響;而群落的不相似性與土壤全氮的含量顯著相關(guān)。

 

3.?土壤變量、柳枝稷產(chǎn)量與AMF群落結(jié)構(gòu)的關(guān)系
在包括施氮處理在內(nèi)的線性混合效應(yīng)回歸模型中,AMF的?ASV多樣性指標(biāo)不能顯著預(yù)測任何地點(diǎn)的柳枝稷產(chǎn)量。在科水平上,AMF豐富度是俄勒岡地塊產(chǎn)量的邊際顯著預(yù)測因子;俄勒岡地區(qū)AMF群落中科水平的豐富度越高,柳枝稷產(chǎn)量就越高,表明隨著AMF家族的豐富,柳枝稷可能由于AMF功能互補(bǔ)而受益于更大的多樣性。

總結(jié)

通過對在威斯康星州柳枝稷的三個生產(chǎn)地點(diǎn)AMF的研究,發(fā)現(xiàn)施氮量對柳枝稷AMF的組成和多樣性沒有一致的影響。此外,本研究中闡明的ASV在理論上代表了柳枝稷土壤中存在的√確、活的基因型。在對AMF物種劃分和種內(nèi)功能多樣性缺乏分類共識的情況下,ASVs可作為一致的序列標(biāo)識,為未來尋求AMF功能和生物地理學(xué)的研究以及區(qū)域適應(yīng)AMF接種的生物勘探提供參考。

百邁客微生物產(chǎn)品研發(fā)團(tuán)隊(duì)通過持續(xù)的研發(fā)投入,大大提高了PacBio?Sequel2的有效CCS數(shù)據(jù)產(chǎn)出,這使得百邁客的全長擴(kuò)增子價格不斷親民化。我們的目標(biāo)是,讓科研人員都可以使用上三代測序技術(shù),通過大樣本量、高深度的測序,來真實(shí)還原研究項(xiàng)目中的菌群規(guī)律。

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